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- SYBR Green I核酸染料(电泳用)
SYBR Green I是高灵敏的DNA荧光染料,适用于各种电泳分析,操作简单:无须脱色或冲洗。至少可检出20pg DNA,高于EB染色法25-100倍。SYBR Green I 与dsDNA 结合荧光信号会增强800-1000倍,用SYBR Green I染色的凝胶样品荧光信号强,背景信号低。可适用于多种电泳分析。
SYBR Green I 适合于多种凝胶电泳方法:琼脂糖凝胶,聚丙烯酰胺凝胶电泳,脉冲电场凝胶电泳,和毛细管电泳等。
SYBR Green I 与双链DNA的亲和力非常高,因此可以用做电泳前染色,对分子生物学中常用的酶(如:Taq 酶、逆转录酶、内切酶、T4连接酶等)没有抑制作用。另外,SYBR Green I 与EB相比,诱变能力大大降低。
SYBR Green I 核酸染料特点
◆ 高灵敏:至少可检出20pg DNA,高于EB染色法25-100倍。
◆ 信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低。
◆ 操作简单:无须脱色或冲洗。
◆ 适用范围广:可适用于多种电泳分析。
◆ 使用方便:不影响其它修饰酶作用。
◆ 经济:价格比银染便宜。
电泳用SYBR Green I 使用方法
SYBR Green I预染方法
◆ 该方法适于琼脂糖凝胶电泳和PAGE凝胶电泳
◆ 工作液的配制:用电泳缓冲液将10000×的SYBR GreenⅠ稀释100倍,即为SYBR GreenⅠ工作液。SYBR GreenⅠ工作液可以置2-8℃冷藏一个月以上。
◆ 制胶:按常规方法制胶,不含任何染料。
◆ 样品染色:向分析样品中加入SYBR GreenⅠ工作液和载样缓冲液,室温放置10分钟,使SYBR GreenⅠ与样品中DNA充分结合。SYBR GreenⅠ工作液加入量为总上样量的1/10。
◆ DNA Marker染色:将5μL DNA Marker和5μL DNA Marker稀释液和1μLSYBR GreenⅠ工作液混匀,室温放置5分钟,使SYBR GreenⅠ与DNA充分结合。
◆ 上样、电泳:按常规操作。
SYBR Green I后染方法
◆ 按照常规方
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